愛先藍-糖原(AB-PAS)染液的儲存條件
(AB-PAS Stain)
染色原理
中性粘液物質含有氨基己糖基,酸性粘液物質也含有氨基己糖,并含有各種酸根。前者多見于冒粘膜的表面上皮,十二指腸腸腺、領下腺和前列腺上皮等:后者多見于呼吸道和消化道的杯狀細胞、主動脈壁、軟骨基質、角膜和皮膚等。胃粘膜表面上皮分泌中性粘液,而胃的腸腺化生或腸型胃癌細胞分泌酸性粘液,但胃型胃癌的癌細胞則分泌中性粘液。這二種粘液在蘇木素-伊紅染色時較難區分,而用(AB-PAS)染色時酸性粘液可被愛先藍染為藍色,中性粘液則可被 PAS染為紅色。
試劑組成
儲存條件及有效期
室溫密封保存,有效期為 12 個月。試劑二和試劑三應用液若本次實驗未用完,需-20C冰
箱冷凍避光保存。下次實驗臨用前,需平衡到室溫再使用。
樣本處理
石蠟切片
脫蠟:石蠟切片在脫蠟劑中脫蠟 2 次(最好在 37C氣浴箱中進行),每次 10~15 分鐘。(本
所有無毒環保拖拉機供應)
梯度入水: 95%、70%、30%乙醇各2 分鐘,蒸餾水2 分鐘
染色步驟
玻片法:
1.蒸餾水稍洗樣本,滴加愛先藍染液染色 10~20 分鐘,水洗 30 秒左右;
2.將高碘酸染液滴加在玻片的樣本上,使其全部覆蓋樣本,將此玻片輕輕平放于染色架上,
室溫孵育 10 分鐘。
3. 取出染色玻片,蒸餾水洗玻片2~3 分鐘。
4.玻片未完全干透前,滴加雪夫試劑于玻片樣本上,用洗耳球將染液吹勻并全部覆蓋樣本,
室溫孵育 3~5 分鐘
5. 孵育結束后,取出染色玻片,自來水流水緩慢沖洗玻片 5 分鐘
6. 滴加蘇木素染色 20~30 秒,流水沖凈,待干后鏡檢。建議封片后觀察.
染缸法:
1.蒸餾水稍洗樣本,將玻片放入愛先藍染液的染缸中染色 10~20 分鐘,水洗 30 秒左右;
2.將玻片放入裝有高碘酸的染缸中,室溫孵育 10 分鐘。
3.取出染色玻片,蒸餾水洗玻片 2~3 分鐘。
4.玻片未完全干透前,將玻片放入裝有雪夫試劑的染缸中,室溫孵育 3~5分鐘。
5.孵育結束后,取出染色玻片,自來水流水緩慢沖洗玻片 5 分鐘。
6.放入裝有蘇木素染液的染缸中染色 20~30 秒,流水沖凈,待干后鏡檢。建議封片后觀察。
染色結果
酸性粘液物質呈藍色,中性粘液物質呈紅色,混合粘液物質呈紫紅色,細胞核呈淺藍色
愛先藍-糖原(AB-PAS)染液的儲存條件
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