免疫組化的優點和使用注意事項
免疫組化是免疫組織化學技術的簡稱,是指觀察普通細胞以及組織的結構,同時可以進行抗體染色,這樣能夠針對組織的來源以及性質能夠進一步的判斷。
免疫組化是病理學檢查的常用技術,基本原理就是利用人體內抗體和抗原之間具有高度特異性結合的原理。主要包括以下分類技術:1、免疫熒光細胞化學技術;2、免疫酶細胞化學技術;3、免疫膠體金技術。
免疫組化的優點是特異性好、敏感性高、簡便快速、費用相對低廉、重復性較好。
免疫組化具有特異性強、敏感性高、定位準確、形態與功能相結合等多種優點,可應用于確定細胞類型、發現微小轉移灶、了解分化程度、腫瘤起源與分化、指導治療與預后等多個方面
免疫組化實驗的注意事項如下:
確認是否忽略了應該加的某種試劑,包括一抗、二抗、三抗及底物等。
確認所有的試劑是否按正確的順序加入,是否孵育了足夠的時間。
對照抗體的標簽確認是否使用了正確的抗體,以及所用的檢測系統是否和一抗匹配。
檢查抗體所使用的稀釋度及稀釋溶液。
檢查抗體的有效期和保存條件,尤其是標記了酶或熒光素的抗體。
檢查標本的儲存條件,最好用已知陽性的標本來同時做陽性對照。
檢查色原/底物溶液,最簡單的檢測方法是將一滴標記有酶的抗體加入到制備好的底物溶液中,如果底物發生預期的顏色變化,則可排除底物的因素。
免疫組化的優點和使用注意事項