產(chǎn)品更新僅供科研-人胚腎細胞
傳代方法 復蘇步驟:①凍存管從液氮或-80℃冰箱中取出放入PE手套中,迅速沒入37℃水浴鍋,搖晃凍存管加速溶解,以1min內(nèi)全部溶解為宜;②在超凈臺中將溶解好的細胞液加入到裝有9mL完-全培養(yǎng)基的離心管內(nèi),1000-1200rpm離心5min,棄去上清液,用1-2mL完-全培養(yǎng)基重懸細胞。③將細胞懸液加入到含有5-6mL完-全培養(yǎng)基的T25瓶中,放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
細胞傳代:①將舊培養(yǎng)液吸除,PBS清洗兩遍后,加入1-2mL胰-酶(0.25%Trypsin+0.02%EDTA);②鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時(可用吸管吸起些許-胰-酶輕輕吹打細胞層某處,肉眼可見細胞層脫落,即消化完成,否則繼續(xù)消化),直接吸掉胰-酶,加入5-6mL完-全培養(yǎng)基,輕輕吹打細胞層,把細胞層吹落,吹散。③將細胞懸液按1:2比例分到新的T25瓶中,添加適當?shù)耐?全培養(yǎng)基,把細胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。;④注意培養(yǎng)基pH值變化和細胞密度,定期換液(每周2-3次),待細胞密度達到80%-90%時,重復傳代操作或者凍存。
生長條件 37℃;5%CO2+95%空氣;
生長特性 貼壁生長
存儲條件 液氮
類型 貼壁生長
安全等級 1
形態(tài) 上皮細胞樣,短梭形,邊緣不規(guī)則,單層貼壁生長,背景干凈
分離基物 胚腎;5型腺病毒及SV40轉(zhuǎn)化;女性
應用領域 表達SV40大T抗原,可用于轉(zhuǎn)染和作為包裝細胞;用于瞬時轉(zhuǎn)染時可高表達AP融合蛋白。293細胞是轉(zhuǎn)染腺病毒E1A基因的人腎上皮細胞系,293T細胞由293細胞派生,同時表達SV40大T抗原,含有SV40復制起始點與啟動子區(qū)的質(zhì)粒可以復制。@2017
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