大腸菌群質控樣(定量)有幾種方法
大腸菌群分布較廣,在溫血動物糞便和自然界廣泛存在。調查研究表明,大腸菌群細菌多存在于溫血動物糞便、人類經常活動的場所以及有糞便污染的地方,人、畜糞便對外界環境的污染是大腸菌群在自然界存在的主要原因。糞便中多以典型大腸桿菌為主,而外界環境中則以大腸菌群其他型別較多。
大腸菌群是評價食品衛生質量的重要指標之一
一、樣品說明
1. 測試項目:大腸菌群平板計數。
2. 樣品形式:凍干菌粉,包裝于真空西林瓶內。
3. 樣品保存:收到樣品后立即按照產品證書中推薦的儲存溫度保存。
4. 樣品復溶:下列兩種方法任選其一。
方法一:樣品需要用總計 1.5mL 稀釋液再水化。樣品開啟后,立即加入 1.5mL 稀釋液,待溶解
后震蕩均勻,即為待測樣品原液,小取樣量為 1mL。
方法二:樣品需要用總計 40mL 稀釋液再水化。樣品開啟后,立即加入 3-4mL 稀釋液,待溶解
后吸出放入無菌瓶中,再反復用余下的稀釋液清洗西林瓶內壁,回收清洗液放入上述無菌瓶中,即
為待測樣品原液,小取樣量為 25mL。
二、注意事項
1. 收到樣品后,請按照產品標簽標注的儲存條件保存。
2. 從冰箱中取出的樣品需在室溫平衡 30-60min 再使用。
3. 西林瓶內樣品處于真空狀態,開啟時要小心。
4. 從開啟樣品到測試結束均應按照無菌操作進行。
5. 凍干粉末狀態的樣品為一個樣品單元,是不可分割的整體,勿取其中一部分測試。
6. 稀釋液可以用生理鹽水或磷酸鹽緩沖液。
7. 用稀釋液溶解樣品時,必須在西林瓶中進行,不允許將西林瓶中的樣品(凍干菌粉)倒出西
林瓶再水化。
8. 樣品中含有活的微生物(可能含有致病微生物),請不要直接用手接觸西林瓶內樣品,請在
符合生物安全規定的條件下操作。
9. 培養過程中請隨時觀察檢測結果并予以記錄。
大腸菌群主要包括暢桿菌科中韻埃希氏菌屬、檸檬酸桿菌屬、魔雷伯氏菌屬和腸桿菌屬。這些屬的細菌均來自于人和溫血動物的腸道,需氧與兼性厭氧,不形成芽孢;在35~37℃條件下,48 小時內能發酵乳糖聲酸產氣,革蘭氏陰性。大腸菌群中以埃希氏菌屬為主,埃希氏菌屬教俗稱為典型大腸桿菌。大腸菌群都是直接或間接地來自人和溫血動物的糞便。本群中典型大腸桿菌以外的菌屬,除直接來自糞便外,也可能來自典型大腸桿菌排出體外7~30 天后在環境中的變異。所以食品中檢出大腸菌群J表示食品受動人寢溫血動物的糞便污染,其中典型大腸桿菌為糞便近期污染,其他菌屬則可能為糞便的陳舊污染
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