一氧化氮(NO)測試盒,*,歡迎搶購!
一氧化氮NO(即血管內皮舒張因子),在生物體內作為一種反應性*的自由基,兼有信使和神經遞質作用,同時又是一種效應分子,在體內具有廣泛的shen理作用,如松弛血管平滑肌,抑制血小板聚集,調節腦血流,介導細胞毒效應和免疫調節,參與學習和記憶、動脈粥樣硬化等作用。NO產生異常于某些疾病的發生有著密切關系。
NO本身半衰期極短,血液中的NO主要由血管內皮細胞、血管平滑肌細胞、血小板、巨噬細胞等產生以硝酸鹽及亞硝酸鹽的形式存在,通過其濃度可以間接測得NO的濃度。
NO遇氧及水生成硝酸鹽及亞硝酸鹽,后二者遇硝酸鹽顯色劑可生成淡紅色偶氮化合物,通過檢測可得知NO 濃度。
試劑組成 | 保存及有效期 | 備注 |
試劑一,20mlx1瓶 | 4°C保存一年 |
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試劑二,10mlx1瓶 | 4°C保存一年 |
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試劑三,10mlx1瓶 | 4°C避光保存 | 過飽和溶液,如果結晶析出,60°C以上加熱溶解*以后使用 |
試劑四,3mlx1瓶 | 4°C避光保存 |
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試劑五,3mlx1瓶 | 4°C保存 |
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2mmol/L標準液,1mlx1支 | 4°C保存 |
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顯色劑的配置: 試劑三:試劑四:試劑五=2.5:1:1,現用現配,配好的顯色劑放冰箱保存,顏色變得很深后不可使用
20umol/L標準液配置:取2mmol/L標準液0.1ml加雙蒸水定容到10ml即為20umol/L 標準液,現用現配。
血清(血漿):取血清(血漿)原液100ul加試劑一200ul,混勻,加試劑二100ul,漩渦充分混勻后靜置10分鐘,3500-4000轉/分鐘,離心15分鐘,取上清160ul操作。
組織:取10%勻漿上清300ul加試劑一200ul,混勻,加試劑二100ul,漩渦充分混勻后靜置10分鐘,3500-4000轉/分鐘,離心15分鐘,取上清160ul操作。
| 空白孔 | 標準孔 | 測定孔 |
雙蒸水 | 160ul |
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20umol/L標準液 |
| 160ul |
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上清液 |
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| 160ul |
顯色劑 | 80ul | 80ul | 80ul |
混勻,靜置15分鐘,波長550nm,用酶標儀測定各孔吸光度OD值。
A. 取血清0.1ml,按照測定要求所示,進行操作,所得空白孔吸光度為0.0406,標準孔為0.4117,測定孔吸光度0.0795,計算如下:
NO含量= (0.0795-0.0406)÷(0.4117-0.0406)X20X4=8.38 umol/L
B. 取10%組織勻漿上清,按照測定所示要求,進行操作,所得空白孔吸光度為0.0406,標準孔吸光度為0.4117,測定孔吸光度0.0543,同時測得組織勻漿上清中總蛋白濃度為11.6574gprot/L,計算如下:
NO含量= (0.0543-0.0406) ÷(0.4117-0.0406)x20x2÷11.6574=0.127umol/gprot