顯色劑是elisa試劑盒中*的試劑之一。
什么是顯色劑?就是能夠和某些試劑反應生成特殊的顏色的試劑。常用于鑒識某種生物堿。但顯色反應受生物堿純度的影響很大,生物堿愈純,顏色愈明顯。常用的顯色劑有:
(1)礬酸銨一濃硫酸溶液(Mandelin試劑)為1%礬酸銨的濃硫酸溶液。如遇阿托品顯紅色,可待因顯藍色,shide寧顯紫色到紅色。
(2)鉬酸銨一濃硫酸溶液(Frohde試劑)為1%鉬酸鈉或鉬酸銨的濃硫酸溶液,如遇wutou堿顯黃棕色,小檗堿顯棕綠色,阿托品不顯色。
(3)甲醛一濃硫酸試劑(Marquis試劑)為30%甲醛配置溶液0.2ml與10ml濃硫酸的混合溶液。如遇顯橙色至紫色,可待因顯紅色至黃棕色。
(4)濃硫酸 如遇wutou堿顯紫色、小檗堿顯綠色,阿托品不顯色。
(5)濃硝酸 如遇小檗堿顯棕紅色,秋水仙素顯藍色,coffee堿不顯色。
碘:
適用于不飽和或者芳香族化合物
配制方法:在100ml廣口瓶中,放入一張濾紙,少許碘粒。 或者在瓶中,加入10g碘粒,30g硅膠
KMNO4
適用于含還原性基團化合物,比如羥基,氨基,醛
配制方法 :1.5g KMnO 4 + 10g K 2 CO 3 + 1.25mL 10% NaOH + 200mL 水. 使用期3個月
磷鉬酸(PMA)
廣譜
配制方法 :10 g of 磷鉬酸+100 mL 乙醇
紫外燈
適用于含共軛基團的化合物,芳香化合物
硫酸鈰
生物 堿
配制方法:10%硫酸鈰(IV)+15%硫酸的水溶液
氯化鐵
苯酚類化合物
配制方法:1% FeCl 3 + 50% 乙醇水溶液.
桑色素(羥基黃酮)
廣譜, 有熒光活性
配制方法:0.1% 桑色素+甲醇
茚三酮
適用于 氨基酸
配制方法:1.5g 茚三酮 + 100mL of 正丁醇+ 3.0mL 醋酸
二硝基苯肼(DNP)
適用于醛和酮
配制方法:12g二硝基苯肼+ 60mL 濃硫酸 + 80mL 水 + 200mL 乙醇
(香蘭素)
廣譜
配制方法:15g + 250mL 乙醇 +2.5mL 濃硫酸
溴甲酚綠
適用于羧酸,pKa<=5.0
配制方法 :在100ml乙醇中,加入0.04g溴甲酚綠,緩慢滴加0.1M的NaOH水溶液,剛好出現藍色即至。
鉬酸鈰
廣譜
配制方法:235 mL 水 + 12 g 鉬酸氨 + 0.5 g 鉬酸鈰氨 + 15 mL 濃硫酸
茴香醛(對甲氧基苯甲醛)1
廣譜
配制方法:135 乙醇 + 5 mL 濃硫酸 + 1.5 mL of 冰醋酸 + 3.7 mL 茴香醛,劇烈攪拌,使混合均勻.
茴香醛(對甲氧基苯甲醛)2
適用于萜烯,桉樹腦(cineoles), withanolides, 出油柑堿(acronycine)
配制方法:茴香醛:HClO4:丙酮:水 (1:10:20:80)