產品說明: β-木糖苷酶(EC3.2.1.37)存在于植物、細菌和真菌等生物體,是催化木聚糖類半纖維素降解的關 鍵酶,產物木糖可作為碳源應用于微生物發酵。另外,β-木糖苷酶還可以作為生物漂白劑應用于造 紙工業,比傳統的漂白法環保,具有廣泛的應用價值。 β-木糖苷酶催化對硝基苯酚-β-D-木糖苷產生對硝基苯酚,對硝基苯酚在405nm 處有特征吸收峰, 測定405nm 光吸收增加速率,可計算β-木糖苷酶活性。 自備實驗用品及儀器 天平、低溫離心機、可見分光光度計、1 mL 玻璃比色皿和蒸餾水。 操作步驟: 一、粗酶液提取 1. 植物樣本:稱取約0.1g 樣品,加1.0 mL 提取液充分冰浴勻漿,然后12000rpm,4℃,離心20min, 棄沉淀,取20μL 上清測定蛋白含量,剩余上清作為待測酶液。 2. 細菌、真菌樣本:收集約500 萬個細胞,加入1.0 mL 提取液,超聲波破碎(冰浴,功率300w, 超聲3 秒,間隔7 秒,總時間3min);然后10000rpm,4℃,離心10min,棄沉淀,取20μL 上 清測定蛋白含量,剩余上清置于冰上待測。 3. 標準液的處理:用試劑二將標準液稀釋至0.2、0.1、0.05、0.025、0.0125、0.00625、0 ?mol/ml。 注意事項: 1、吸光度變化應該控制在0.05-0.6 之間。否則加大樣品量或稀釋樣品,注意計算公式中參與計算 的稀釋倍數要相應改變。 2、樣品蛋白質含量需要另外測定,可選用考馬斯亮藍法蛋白含量測定試劑盒進行測定。 |