微生物環境衛生的檢測
一、 消毒液藥效的微生物學鑒定法
1采樣對象:正常使用的消毒液,和已知配制好備用的消毒液
2采樣及檢驗方法
在無菌條件下,用無菌吸管吸取1毫升樣液,加入9毫升稀釋液中混勻,對于醇類與酚類消毒劑,稀釋液用普通營養肉湯即可;對于含氯消毒劑、含碘消毒劑,需在肉湯中加入0.1%硫代硫酸鈉,對洗必泰、季銨鹽類消毒劑,需在肉湯中加入3%(W/V)土溫80和0.3%卵磷脂;對醛類消毒劑,需在肉湯中加入0.3%苷氨酸;對于含有表面活性劑的各種復方消毒劑,需在肉湯中加入(W/V)土溫80,以中和被檢樣液中的殘效作用,
將注入了樣液的稀釋液充分搖勻,取1毫升注入平皿,隨之倒入普通營養瓊脂,待瓊脂凝固后,翻轉平皿,將平皿于37℃條件下培養24小時后計平板上生長的菌落數。
3結果分析
平板上有菌生長,表明被檢樣液中有殘存活菌,若每個平板菌落數在10個以下,仍可用于消毒,若每個平板菌落數超過10個,說明每毫升被檢樣液含菌量已超過100個,即不宜在用于消毒。
該公式是一個經驗公式.它的理論模式依據是:100CM2的面積上10MIN降落的菌落數,
等于1升空氣中所含的細菌總數.系數50000基于上述假說和單位換算而來.
細菌總數(CFU/M3)=5/10T*100/A*1000*N=50000*N/AT
5/10T:實際放置了5MIN;
100/A:A單一培養皿面積;
1000:1M3=1000L啊,換算成m3
1、空氣細菌落菌數單位既然是cfu/m3,那采樣時應該還要記錄放置平皿的高度。
2、食品安全管理體系中罐頭行業有個標準如下:
落下菌數 空氣污染程度 評價
30以下 清潔 安全
30~50 中等清潔
50~70 低等清潔 應加注意
70~100 高度污染 對空氣要進行消毒
100以上 嚴重污染 禁止加工
二、人員手表面細菌污染情況的檢驗
1. 采樣方法:用一支蘸有無菌生理鹽水的棉拭子涂擦被檢對象手的全部,反復兩次,涂擦的時候棉拭子要相應地轉動,擦完后,將手接觸部分剪去,將棉拭子放入裝有10毫升無菌生理鹽水的試管內送檢培養。
2. 檢驗方法:同工器具表面細菌總數檢驗方法。
3. 結果計算:每只手表面的細菌總數(cfu/只手)=平皿上菌落的平均數× 樣液稀釋倍數
三、設備的采樣與檢驗方法
根據生物試劑過程所要求的重點衛生部位,實驗室對其進行涂抹采樣,進行細菌總數檢驗。
1采樣方法
1.1涂抹法(適用于表面平坦的設備和工器具產品接觸面)
取經過滅菌的鋁片框(框內面積為50平方厘米)放在需檢查的部位上,用無菌棉球蘸上無菌生理鹽水擦拭鋁片中間方框部分,擦完后立即將棉球投入盛有10毫升無菌生理鹽水的試管中,此液每毫升代表5平方厘米。
1.2貼紙法(適用于表面不平坦的設備和工器具接處面)
將無菌規格紙(5×5厘米,紙質要薄而軟)用無菌生理鹽水泡濕后,于需測部分分別貼上兩張,兩張紙面積共50平方厘米,然后取下放入盛有10毫升無菌生理鹽水的試管中,此液每毫升代表5平方厘米。
2檢驗方法
2.1細菌總數的檢驗
將上述樣液充分振搖,根據衛生情況,相應地做10倍遞增稀釋,選擇其中2-3個合適的稀釋度作平皿傾注培養,培養基用普通營養瓊脂,每個稀釋度作2個平皿,每個平皿注入1毫升樣液,于37℃培養24小時后計菌落數。
結果計算
表面細菌總數(cfu/cm2)=平皿上菌落的平均數×樣液稀釋倍數/30×2
2.2致病菌的檢驗
沙門氏菌,參照GB4789.4進行
金黃色葡球菌,參照GB7918.5進行
4.檢驗合格標準:細菌總數10-100個∕cm2,
5.關鍵點:細菌總數≤10個∕cm2
一般區域:細菌總數≤100個∕cm2
四、空氣采樣及檢驗方法
1培養基:普通營養瓊脂平板,按GB4789.28中3.7條配制
2采樣(空氣沉降法)
2.1布點:面積小于30平方米的車間,設一對角線,在線上取3點,即中心一點,兩端在距墻1米處各取一點;面積大于30平方米的車間,設東、西、南、北、中5個點,其中東、西、南、北點均距墻1米。
2.2采樣高度:與地面垂直高度80-150厘米。
2.3采樣方法;用直徑為9厘米的普通營養瓊脂平板在采樣點上暴露20分鐘蓋上送檢培養。
3培養:于37℃培養24小時。
4檢測頻率:每周
空氣質量標準:
生車間、熟車間、成品車間:低于100個;半成品庫、成品庫:低于10個.