T細(xì)胞亞群檢測(cè)試劑盒簡(jiǎn)直太好用了
標(biāo)本制備：
取肝素抗凝（25μl/ml）的靜脈血1～2ml，PBS稀釋1-2倍后，沿裝有等量淋巴細(xì)胞分離液的試管壁混勻緩慢加至液面上層，保持兩種液體界面清晰，離心（2000轉(zhuǎn)/分）15-20分鐘，吸取兩液面交界處的單個(gè)核細(xì)胞層，加5倍PBS，離心（1000轉(zhuǎn)/分）5分鐘，棄上清液，沉淀即為單個(gè)核細(xì)胞。利用試管中剩余的少許回流液體（約一滴）混勻細(xì)胞，制成單個(gè)核細(xì)胞懸液。滴30μl細(xì)胞懸液于載玻片上，靜置2分鐘使細(xì)胞下沉粘附于玻片上，吸去液體，快速吹干或37℃溫箱1小時(shí)烤干。或用PBS將單個(gè)核細(xì)胞調(diào)至2×105個(gè)/ml，離心涂片機(jī)1000轉(zhuǎn)離心1-2分鐘制片，快速吹干或37℃溫箱1小時(shí)烤干。涂片前取防脫片劑5-10μl均勻推片，亦可用棉簽粘取防脫片劑均勻涂于干凈玻片上，待干后制備細(xì)胞涂片，以防掉片。
T細(xì)胞研究中通常研究的三個(gè)亞型包括
●殺傷性T細(xì)胞(細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞: CD8+) ，這種細(xì)胞可識(shí)別抗原，抗原由與宿主細(xì)胞結(jié)合的致病原釋放。殺傷性T細(xì)胞能夠識(shí)別不同的細(xì)胞類型和病原體并與其發(fā)生相互作用。T細(xì)胞受體結(jié)合外來抗原，觸發(fā)細(xì)胞毒素釋放進(jìn)入受感染的細(xì)胞，導(dǎo)致細(xì)胞死亡。
●輔助T細(xì)胞(Th細(xì)胞: CD4+)，可促進(jìn)免疫系統(tǒng)對(duì)抗感染。Th細(xì)胞識(shí)別并結(jié)合致病抗原，導(dǎo)致可溶性因子(細(xì)胞因子)的釋放，進(jìn)而將信號(hào)傳導(dǎo)至免疫系統(tǒng)的其余部分以啟動(dòng)應(yīng)答。Th細(xì)胞分為不同的亞型，包括Th1細(xì)胞和Th2 細(xì)胞。Th1細(xì)胞可結(jié)合具有吞噬功能的巨噬細(xì)胞和樹突細(xì)胞。Th2 細(xì)胞結(jié)合和激活B細(xì)胞，這是產(chǎn)生抗體的必要過程，從而保證對(duì)特定細(xì)菌或病毒感染的終生免疫力。
●調(diào)節(jié)性T細(xì)胞(Treg 細(xì)胞: CD4+、 CD25+、Foxp3+、 CD127+)，可保持免疫系統(tǒng)功能正常。一旦發(fā)生了免疫反應(yīng)，這類細(xì)胞可確保反應(yīng)得到終止。這種調(diào)節(jié)機(jī)制抑制了免疫活性，從而防止過度免疫反應(yīng)。正常運(yùn)作的Treg 細(xì)胞對(duì)預(yù)防自身免疫病至關(guān)重要。
注意事項(xiàng)：
1.免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)是一種包含多步驟的檢測(cè)方法，試劑的選擇、樣本的處理、涂片的制備、染色及其結(jié)果的判讀均需要進(jìn)行專業(yè)的培訓(xùn)。
2.任何陽(yáng)性或陰性的解讀，應(yīng)由病理科醫(yī)生結(jié)合病理形態(tài)學(xué)，表現(xiàn)及其它檢測(cè)方法進(jìn)行，不作為單獨(dú)的診斷指標(biāo)。
3.復(fù)染過度或不足都可能影響結(jié)果的判讀。
4.陰性結(jié)果表示未檢出抗原，不一定表示樣本中無(wú)該抗原存在，待測(cè)抗原編碼基因變異，抗原低表達(dá)或抗原修復(fù)不當(dāng)?shù)龋紩?huì)造成抗原無(wú)法檢出。
5.本試劑僅對(duì)經(jīng)處理的人外周血細(xì)胞進(jìn)行驗(yàn)證，不做其他用途
6.試劑盒使用中，應(yīng)有適當(dāng)?shù)姆雷o(hù)措施，以避免試劑同皮膚和眼睛接觸。
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