固定的目的在于保存細胞和組織的原有形態結構,固定劑能阻止內源性溶酶體酶對自身組織和細胞的自溶、抑制細菌和霉菌的生長。固定劑通過凝固、生成添加化合物等使蛋白質內部結構發生改變,從而使酶失活。固定劑對細胞核細胞外成分發生物理改變。未固定前活細胞被包裹在不能穿透的膜內,固定劑能夠破壞這一屏障,使大分子物質穿透膜、逸出。
選擇固定液對組織染色和免疫組化染色都極其重要,通常將幾種固定劑混合配制成復合固定液,這樣可以適應多種組織、細胞成分的保存,然而目前還沒有一種標準的固定液適用于所有的組織、細胞成分的保存。固定液主要分為醛類固定液、汞類固定液、醇類固定液、氧化劑類固定液、苦尉酸鹽類固定液等,較為常用的是醛類中的福爾馬林、醇類中的乙醇。
AAF固定液又稱酒精醋酸福爾馬林混合固定液或FAA固定液,主要由乙醇(A)、乙酸(A)、甲醛(F)組成,兼有脫水作用。
產品組成:
名稱AAF固定液
規格:500ml
儲存條件:RT避光 6個月
用途:也叫FAA/AFA固定液,組織化學中細胞或組織切片的固定。
注意事項:主要由乙醇、冰乙酸、甲醛等組成。常用于快速脫水和固定以及冷凍切片的快速固定。可作為組織材料的保存劑。
操作步驟(僅供參考):
1、 按實驗具體要求操作。
2、 取新鮮組織入AAF固定液,置于冰箱內低溫固定10~30min。
3、 常規石蠟切片因固定不佳導致染色效果不滿意時,可在染色前再用AAF固定液固定5min,染色效果會有明顯提高。
注意事項:
1、 AAF固定液對人體有一定的損害,請在通風好的環境下小心操作,避免吸入。
2、 固定液pH接近用中性,pH范圍6~8。
3、 組織取材的厚度不同,固定時間也不同,對組織恰當的選材有利于固定液的滲透。常規 活檢組織比較適合的厚度為2~4mm,一般不超過6mm。
4、 固定液的容量應足夠,一般固定液與組織塊的體積比率應大于10:1。如果容積不夠大,可以在固定期間更換1~3次固定液。
5、 溫度對固定的影響很明顯,提高溫度可以加速固定作用,但溫度不宜過高。
6、 取出新鮮組織后,應及時固定,無法及時固定時,應保存于生理鹽水中及時送檢。
7、 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
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