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蘋果酸脫氫酶(MDH)提取液的實驗注意事項
更新時間:2019-05-06   點擊次數(shù):1606次

    蘋果酸脫氫酶(Malate Dehydrogenase, MDH)是合成蘋果酸的關(guān)鍵酶之一,催化蘋果酸和草酰乙酸(OAA)的相互轉(zhuǎn)化,參與眾多生理代謝途徑如TCA循環(huán)C4循環(huán)脂肪酸的氧化呼吸作用氮同化等,因此MDH在植物的生長發(fā)育中發(fā)揮著重要作用,廣泛存在于線粒體、細(xì)菌細(xì)胞膜上,為三羧酸循環(huán)中的一種酶,由于酶的來源不同,其某些性質(zhì)也不盡相同。MDH在細(xì)胞多種生理活動中扮演著重要的角色,包括線粒體的能量代謝、蘋果酸-天冬氨酸穿梭系統(tǒng)、活性氧代謝和抗病性等。
    蘋果酸脫氫酶提取液對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞,各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì),均能破壞抗體的作用,抗體可被中性鹽類沉淀,在生物試劑上常可用硫酸銨或硫酸鈉從免疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經(jīng)透析法將其純化。
蘋果酸脫氫酶(MDH)提取液主要用于裂解植物組織,提取樣品中的蘋果酸脫氫酶。該試劑僅用于科研領(lǐng)域,不宜用于診斷或其他用途。
    蘋果酸脫氫酶(MDH)提取液溫馨提示:

在實驗后,請注意回收稀釋的抗體,回收的抗體在進行Western實驗時至少可以重復(fù)使用10次。

 稀釋后的抗體,包括已經(jīng)使用過的稀釋抗體,4℃保存,回收后重復(fù)使用的抗體,使用方法同新鮮稀釋的抗體。

 如果在重復(fù)使用過程中發(fā)現(xiàn)抗體出現(xiàn)輕微混濁現(xiàn)象,可以10000g離心1-3分鐘,取上清用于后續(xù)檢測。

 如果回收的抗體出現(xiàn)明顯的絮狀物或長霉長菌等情況,則可以考慮廢棄該抗體。
 
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