羥自由基測定試劑盒原理,羥自由基測定試劑盒說明書
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一、測定原理
Fenton反應(yīng)是zui常見的產(chǎn)生羥自由基的化學(xué)反應(yīng),H2O2的量和Fenton反應(yīng)產(chǎn)生的OH.量成正比,當(dāng)給予電子受體后,
用griess試劑顯色,形成紅色物質(zhì),其呈色與OH.的多少呈正比關(guān)系。
二、試劑組成與配制:(50T/48樣)
試劑一:3%H2O2標準品儲備液0.5ml×1支,4℃保存3個月。0.03%標準品應(yīng)用液的配制:3%H2O2標準儲備液:蒸餾水=1:99稀釋,現(xiàn)用現(xiàn)配。
試劑二:底物儲備液1ml×1支,4℃保存3個月。
底物應(yīng)用液的配制:
若您的樣本為產(chǎn)生羥自由基,即測定管吸光度比對照管吸光度低,則底物應(yīng)用液的配制:底物儲備液:蒸餾水=1:99稀釋,現(xiàn)用現(xiàn)配。
若您的樣本為產(chǎn)生羥自由基,即測定管吸光度比對照管吸光度高,則底物應(yīng)用液的配制:底物儲備液:蒸餾水=1:299稀釋,現(xiàn)用現(xiàn)配。
試劑三:甲液儲備液2ml×1支,4℃保存3個月,用時加蒸餾水1:9稀釋成應(yīng)用液。
乙液7ml×2支,4℃保存3個月。
試劑三應(yīng)用液的配制:甲液應(yīng)用液與乙液等比例混合,用多少配多少,余下4℃保存。
試劑四:液體10ml×1瓶,用時加蒸餾水稀釋至100ml,制備成應(yīng)用液,4℃保存。若有結(jié)晶,則放置37℃水浴至全部溶解后再稀釋。
試劑五:液體30ml×1瓶,避光4℃冰箱保存.
試劑六:液體30ml×1瓶,避光4℃冰箱保存.
試劑七:分析純的冰乙酸(冰醋酸)自備。
顯色劑的配制:試劑四應(yīng)用液:試劑五:試劑六:冰乙酸=8:3:3:2,需多少配多少,現(xiàn)用現(xiàn)配。
注:抑制羥自由基的物質(zhì)如:血清(漿)、各種組織勻漿液、口服液等;
產(chǎn)生羥自由基的物質(zhì)如:中性白細胞、某些藥物、部分植物等。
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