人高遷移率族蛋白B1(HMGB-1)elisa試劑盒簡介
高遷移率族蛋白B1([1] ,HMGB1)是一種高度保守的核蛋白,廣泛分布于哺乳動物細胞。隨著其晚期促炎作用的發現,HMGB1成為近年來危重醫學研究的熱點之一。本文就其家族分類、基因和蛋白結構、細胞生物學效應方究進展進行綜述。
中文名 高遷移率族蛋白B1 外文名 high mobility group protein 簡 稱 HMGB1 類 別 核蛋白 發現者 Johns 發現時間 20世紀60年代 分布地區 哺乳動物細胞
人高遷移率族蛋白B1(HMGB-1)elisa試劑盒使用說明書
1、用緩沖液將抗體稀釋至1-10ug/ml。在反應孔中加0.1ml,4℃ 過夜。次日,棄去孔內溶液,用洗滌緩沖液洗3次。
2、加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.05ml于上述已包被之反應孔中,置37℃ 孵育1小時。然后洗滌(同時做空白孔,陰性對照孔及陽性對照孔)。
3、加酶標抗體:于各反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標抗體(經滴定后的稀釋度)0.05ml。37℃ 孵育0.5~1小時,洗滌。
4、加底物液顯色:于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分鐘。
5、終止反應:于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml
6、結果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結果:反應孔內顏色越深,陽性程度越強,陰性反應為無色或極淺,依據所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對照孔調零后測各孔OD值,若大于規定的陰性對照OD值的2.1倍,即為陽性。
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