生物通報道:有些細胞在血液和組織中的含量很少但卻很重要,比如干細胞、循環內皮細胞、循環腫瘤細胞和殘留病變細胞。準確檢測和分析這些稀有細胞,是理解疾病進程和發育機制的關鍵。然而稀有細胞檢測并不是一件容易的事,會受到樣本質量等多種因素的影響。
流式細胞技術能對每個細胞進行多種定量分析,是在血液、骨髓等組織中檢測稀有細胞的有力工具。稀有細胞檢測往往需要大量樣本才能采集到足夠的數據,這個時候傳統流式細胞儀也有些發怵,因為大樣本意味著處理時間長,如果不想犧牲檢測靈敏度,就不能貿然加快進樣速率。
聲波聚焦技術,不做任何無謂的犧牲
樣本溶液注射到流式細胞儀的時候,細胞是隨機分布在三維空間內的。讓這些細胞逐個穿過激光束,對于準確采集數據非常重要。絕大多數流式細胞儀通過快速流動的鞘液實現這一點。鞘液帶動細胞并將其限制在中心位置,進而建立單細胞流,這一過程稱為水動力聚焦。
與傳統水動力聚焦不同的是,聲波聚焦技術利用超聲波將細胞緊密聚集在樣本流中間,匯聚成一條直線。這種超聲波大于2 MHz,與醫學成像中的超聲波類似。聲波聚焦流式細胞儀基本不受進樣速率的影響,能使細胞強聚焦于激光檢測點,與樣本-鞘液的比率無關。(延伸閱讀:Life Tech發布新一代流式細胞儀)
不犧牲通量和精度!--?xml:namespace prefix = o ns = "urn:schemas-microsoft-com:office:office" /--
傳統的水動力聚焦技術受到了不少限制。流速提高會增大樣本流的寬度,使細胞的聚焦效果下降。細胞偏離激光中心越遠,激發光強度變化就越大,CV值也越高。研究人員經常需要在分析通量和精度之間尋求平衡。
聲波聚焦技術在很大程度上與進樣流速無關,不論樣本流與鞘液流的比例如何,都能使細胞緊密地聚集于激光檢測焦點,避免分散。這樣可以采集更多光子,在*的樣本通量下保證高精度分析。
聲波聚焦流式細胞儀在高達1 mL/min的進樣速率下也能維持聚焦,讓研究人員能夠獲得更小的CV值,更好地鑒別弱陽性信號和背景,實現更小的差異和更好的信號分離。
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不犧牲檢測速度
稀有細胞檢測一般需要采集大量細胞,才能獲得準確而可靠的結果。在這種情況下,傳統流式細胞儀需要很長的處理時間。不過,聲波聚焦流式細胞儀的樣本運行速率非??欤蛇_1,000 μL /min),每次運行可采集2000萬個細胞。這么高的樣本采集速率和樣本量可以幫助人們快速準確地檢測稀有細胞,不會影響數據的質量。
不犧牲珍貴樣本
樣本制備對稀有細胞檢測有很大的影響。舉例來說,洗脫和裂解紅細胞(RBC)會造成嚴重的細胞損失和損傷。聲波聚焦流式細胞儀支持無洗脫、無裂解的流式實驗方案,可以zui大程度的保留珍貴樣本,避免不必要的細胞損失,簡化樣本制備步驟。
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