白細胞稀釋液(計數(shù)液)使用步驟
產(chǎn)品簡介:
白細胞(White Blood Cell,WBC)是血液中的一種常見的免疫細胞。
白細胞稀釋液(WBC Dilution)主要由乙酸、亞-甲藍等組成,主要用于白細胞計數(shù),但并不能區(qū)分不同種類的白細胞,作用原理是血液經(jīng)白細胞稀釋液稀釋后成熟紅細胞全部被溶解,充入計數(shù)池后顯微鏡下計數(shù)一定體積內(nèi)白細胞數(shù),換算求出每升血液中白細胞的數(shù)量。該試劑僅用于科研領(lǐng)域,不適用于臨床診斷或其他用途。
自備材料:
1、新鮮全血、微量吸管、血球計數(shù)板、血蓋片、顯微鏡、小號試管
操作步驟(僅供參考):
1、取小號試管,加 WBC Dilution 0.38ml。
2、用潔凈干燥微量吸管取末梢血 20μl,擦去管外余血后加至 WBC Dilution 底部,輕輕將血放出,再輕吸上層清液清洗吸管 2~3 次,立即混勻,稀釋比例為1:20,也可以按照 1:10 或 1:40 的比例稀釋。
3、待紅細胞完-全破壞,液體變?yōu)樽睾稚螅俅位靹蚝蟪涑兀⒁猱a(chǎn)生氣泡或外溢,室溫靜置 2~3min,待白細胞沉淀。
4、置于顯微鏡低倍鏡下依次計數(shù)四角和 4 個大方格內(nèi)的白細胞數(shù),壓線細胞按“數(shù)上不數(shù)下,數(shù)左不數(shù)右"的原則進行計數(shù)。
計算:白細胞數(shù)/L=(N÷4)×10×20×106=(N÷20)×109
注意事項:
1、采血時不能過于擠壓,針刺深度應(yīng)適當。
2、小試管、計數(shù)板均應(yīng)清潔,以免誤認細胞。
3、在參考范圍內(nèi)大方格間的細胞數(shù)不應(yīng)相差 8 個以上,兩次重復(fù)計數(shù)相差不應(yīng)超過10%。4、白細胞數(shù)量過多時可加大稀釋倍數(shù),白細胞數(shù)量過少時可計數(shù) 8 個大方格的白細胞數(shù)或大量取血。
5、白細胞稀釋液僅可計數(shù)白細胞,并不能區(qū)分不同種類的白細胞,如需區(qū)分白細胞應(yīng)選用瑞氏染色液或者瑞氏-姬姆薩復(fù)合染色液。
6、試劑開封后請盡快使用,以防影響后續(xù)實驗效果。
7、為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
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