考馬斯亮藍 G250 染料試劑操作步驟
更新時間:2023-11-17 點擊次數:413次
【產品名稱】 :考馬斯亮藍 G250 染料試劑
【產品規格】 :500ml
【儲存條件】 :常溫密封
【有效期】 :12 個月
【背景介紹】 :
考馬斯亮藍 G250 染料試劑由考馬斯亮藍 G250、乙醇、磷酸等組成,用于考馬斯
染料結合(Bradford)分析的總蛋白測量,其特點在于對蛋白樣品中可能存在的大
多數鹽、溶劑、緩沖液、硫醇、金屬螯合劑、還原性物質等均不排斥,檢測濃度
下限達到 25μg/ml,最小檢測蛋白量達到 0.5μg,待測樣品體積為 1~20μl,
在 50~1000μg/ml 濃度范圍內有較好的線性關系。
【自備材料】:
1、酶標儀或分光光度計 2、蒸餾水 3、96 孔板或比色杯
【操作步驟(僅供參考)】:
1、稀釋蛋白標準(一般為 BSA5mg/ml)使其終濃度為 0.5mg/ml。注意:蛋白樣品
在什么溶液中,蛋白標準也應用什么溶液稀釋,也可以用 0.9%NaCl 或 PBS 稀釋
蛋白標準。
2、將標準品按 0,1,2,4,8,12,16,20μl 加到 96 孔板的蛋白標準孔中,加蛋白標準稀
釋液補足至 20μl。
3、加適當體積樣品到 96 孔板的樣品孔中,補加標準品稀釋液至 20μl。
4、各孔加入 200μl 考馬斯亮藍 G250 染料試劑,室溫放置 3~5min。
5、酶標儀測定 595nm 波長處的吸光值,560~610nm 之間的波長也可。
6、根據標準曲線計算出樣品中的蛋白濃度。
【注意事項】:
1、本產品僅供科研實驗用,不做其它用途。
2、為了您的安全與健康,實驗時請穿實驗服并佩戴一次性手套