細胞抗結團試劑使用注意事項
產品描述
表達細胞系大多都會馴化使其適應無(低)血清以及懸浮培養模式,從而達到更高的細胞密度來提高表達產量。但是馴化的前后過程中以及高密度懸浮培養的情況下,經常會出現細胞之間互相粘附并結團的現象。小規模細胞結團期初并不影響細胞生長,但是隨著結團變大,會導致內層細胞營養不充分從而死亡。死亡后的細胞釋放內容物會影響整體細胞生長,導致更大規模的死亡和結團現象。
本試劑是一種化學成分確定、無蛋白質以及無任何水解產物的濃縮型液體試劑,主要由分散劑和抗剪切保護劑兩部分組成。能夠提供良好的抗剪切力保護的同時,減少細胞間的粘附作用,明顯的改善細胞結團現象,使得到更高的活細胞密度。
操作步驟
注意:以下方案為常規換液添加方案,使用過程中亦可直接添加到正在培養的細胞中。添加體積和下述體積比一致。
1. 將細胞抗結團試劑添加至對應細胞培養基中,添加體積為總體積的2%(不同條件下,所需抗結團試劑量不同,通常1-4%之間,推薦2%,可視情況調整),混勻后配置成工作液;
2. 將懸浮細胞轉移至離心管中,800 g離心3-5 min,去除原有培養基,保留細胞沉淀;
3. 使用上訴含細胞抗結團試劑的工作液重懸細胞,并轉移至相應培養皿或培養瓶中培養。
注意事項
1. 本產品適用于搖床培養條件下馴化懸浮細胞體系,對常規靜置的懸浮細胞,作用可能不明顯。
2. 由于不同細胞間性質不同,步驟中描述的使用濃度范圍僅供參考,可根據具體情況進行調整。
3. 本產品會影響細胞轉染,建議轉染孵育前,更換為正常不含本產品的培養基。在轉染孵育完成后,換液時添加,不影響轉染后的表達。
4. 為了您的健康和安全,操作時請穿好實驗服、戴好手套。
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