細胞抗結(jié)團試劑使用注意事項
產(chǎn)品描述
表達細胞系大多都會馴化使其適應無(低)血清以及懸浮培養(yǎng)模式,從而達到更高的細胞密度來提高表達產(chǎn)量。但是馴化的前后過程中以及高密度懸浮培養(yǎng)的情況下,經(jīng)常會出現(xiàn)細胞之間互相粘附并結(jié)團的現(xiàn)象。小規(guī)模細胞結(jié)團期初并不影響細胞生長,但是隨著結(jié)團變大,會導致內(nèi)層細胞營養(yǎng)不充分從而死亡。死亡后的細胞釋放內(nèi)容物會影響整體細胞生長,導致更大規(guī)模的死亡和結(jié)團現(xiàn)象。
本試劑是一種化學成分確定、無蛋白質(zhì)以及無任何水解產(chǎn)物的濃縮型液體試劑,主要由分散劑和抗剪切保護劑兩部分組成。能夠提供良好的抗剪切力保護的同時,減少細胞間的粘附作用,明顯的改善細胞結(jié)團現(xiàn)象,使得到更高的活細胞密度。
操作步驟
注意:以下方案為常規(guī)換液添加方案,使用過程中亦可直接添加到正在培養(yǎng)的細胞中。添加體積和下述體積比一致。
1. 將細胞抗結(jié)團試劑添加至對應細胞培養(yǎng)基中,添加體積為總體積的2%(不同條件下,所需抗結(jié)團試劑量不同,通常1-4%之間,推薦2%,可視情況調(diào)整),混勻后配置成工作液;
2. 將懸浮細胞轉(zhuǎn)移至離心管中,800 g離心3-5 min,去除原有培養(yǎng)基,保留細胞沉淀;
3. 使用上訴含細胞抗結(jié)團試劑的工作液重懸細胞,并轉(zhuǎn)移至相應培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。
注意事項
1. 本產(chǎn)品適用于搖床培養(yǎng)條件下馴化懸浮細胞體系,對常規(guī)靜置的懸浮細胞,作用可能不明顯。
2. 由于不同細胞間性質(zhì)不同,步驟中描述的使用濃度范圍僅供參考,可根據(jù)具體情況進行調(diào)整。
3. 本產(chǎn)品會影響細胞轉(zhuǎn)染,建議轉(zhuǎn)染孵育前,更換為正常不含本產(chǎn)品的培養(yǎng)基。在轉(zhuǎn)染孵育完成后,換液時添加,不影響轉(zhuǎn)染后的表達。
4. 為了您的健康和安全,操作時請穿好實驗服、戴好手套。
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