液體樣本總蛋白提取試劑盒簡便,效率高
描述:
本試劑盒能夠在15分鐘內對液體樣品中的蛋白進行提取濃縮,或脫鹽、脫去垢劑、脫還原劑等。適用于各種液體樣品(10µL~1L),如蛋白溶液、胞漿胞核蛋白提取液、細胞或微生物培養基上清液、血液、尿液、腦脊液等各種體液;也適于從細胞懸液提取總蛋白。蛋白回收率95-100%,遠高于經典的丙酮或三氯醋酸沉淀法,且可有效去除樣品中的脂質,不影響后續SDS-PAGE和Western Blot等生物實驗。可用1.5ml離心管微量提取也可大規模制備,簡便高效。
組成和保存:
濃縮試劑50ml,適用100x 100ml次濃縮提取。4℃保存 12個月有效
適用樣品:
1. 液體樣品如蛋白溶液、胞漿胞核蛋白提取液、細胞或微生物培養基上清液、血液、尿液、腦脊液等各種體液。2. 原代或傳代細胞懸液,可按液體方式提取總蛋白。
注意
1. 可室溫操作。1 mg/ml總蛋白可被有效沉淀,更低濃度的蛋白可加入白蛋白做載體幫助沉淀。可有效去除液體樣品中的鹽(1M)、還原劑(1%巰基乙醇
或DTT)、去垢劑(5%SDS、1% Triton X-100、1% NP-40、油脂等。如果上述成分濃度過高,用水稀釋后進行提取。干燥蛋白沉淀可4℃或-20℃長期保
存。
2. 血漿蛋白或疏水蛋白溶解較慢,反復數次95℃煮并加以-20℃凍融可助溶。必要時4℃溶解過夜,或用2% SDS溶解沉淀,95℃煮,然后離心去除不
溶解物。
3. 如定量蛋白應使用不含溴酚藍的凝膠上樣緩沖液溶解沉淀,蛋白定量后再加入溴酚藍。
4. 提取培養細胞總蛋白:用蒸餾水或1% SDS制備一定體積的細胞懸液,振蕩裂解細胞,然后執行上述液體樣品蛋白提取程序。
5. 實體組織的蛋白提取可使用P1250實體組織和細胞蛋白抽提試劑盒。
6. 提取試劑有刺激性,一旦接觸立即用水清洗。
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