阿利新藍染色液使用小竅門
簡介:阿利新藍(Alcian)又稱愛先藍或阿爾辛藍等,是一種陽離子染料,染料與酸性基團形成鹽鍵。利用染料的不同pH及不同電解質濃度,可區分酸性黏液物質的類別。阿利新藍作為一種類銅鈦花青共軛染料,最初用于紡織纖維染色。這種陽離子染料與酸性基團結合,也即阿爾辛藍與組織內含有的陰離子基團如羧基和硫酸根形成不溶性復合物。阿利新藍由中央含銅的酞菁環與四個異硫脲基通過硫醚鍵相連而成,該異硫脲基呈中度堿性,使阿利新藍帶陽離子。pH 值為2.5時,組織內的羧基電離,帶有一個負電荷,與阿利新藍中的陽離子形成鹽鍵,使帶有羧基的酸性黏液物質(硫酸黏蛋白和唾液黏蛋白)染色。
阿利新藍染色液(pH1.0)利用染液的不同 pH 值可區分粘液物質的類屬,pH為1時,羧基(COOH)不著色,硫酸基(OSO3H)著色,pH為2.5時,羧基染色良好而硫酸粘液著色不佳。pH 值為 1.0 時,組織內的硫酸根電離,帶有一個負電荷,與阿利新藍中的陽離子形成鹽鍵,使帶有硫酸根的組織(如硫酸黏液物質)染色。中性黏蛋白(如胃黏膜和 Brunner 腺體部位的中性黏蛋白)不能與阿利新藍反應。
保存條件:
室溫保存。
操作步驟(僅供參考):
1、二甲苯脫蠟,通過梯度乙醇后,入蒸餾水再水化。
2、Alcian酸化工作液浸泡5min。
3、Alcian染色液浸染30min。
4、流水沖洗。
5、Alcian酸化工作液稍洗。
6、不經水洗,直接用濾紙吸干多余的Alcian酸化工作液。
7、核固紅染色液,復染,流水沖洗。
8、常規乙醇脫水,二甲苯透明,中性樹膠封片。
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