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RNAwait非凍型組織RNA保存液操作指南
更新時間:2022-07-07   點擊次數:1124次

RNAwait非凍型組織RNA保存液操作指南


RNAwait是一種液態的,無毒的組織RNA保存試劑,能迅速滲入組織抑制RNAase,穩定并保護組織樣品中的RNA。本產品應用范圍廣,適用于多種動物組織(如肝臟、腦、肺、脾臟、腎臟、肌肉組織等),還可用于酵母、細菌、真菌、細胞以及某些植物樣品的RNA保存。經RNAwait浸潤的組織或細胞,可在37℃保存1天,室溫保存1周,4℃保存4周,-20℃/-80℃長期保存。本產品幾乎兼容所有的RNA分離方法,如Trizol法、離心柱法和磁珠純化法等。


操作指南

1. 樣品處理

1) 動物組織樣品:將組織剪切成長寬高均不大于0.5厘米的組織塊,迅速加入5-10倍體積的RNAwait。注意如骨頭等液體滲透性較弱的組織,不適合用本品進行RNA保護。

2) 細胞樣品:收集細胞沉淀,用PBS洗滌后,5000g離心1-2分鐘,吸除PBS后小心加入5-10倍體積的RNAwait,避免吹起細胞。

3) 細菌樣品:12000g離心2min,棄上清加入5-10倍體積RNAwait試劑,對酵母和真菌樣品進行保存時,請參考細菌處理方法。

2. 樣品保存

1) 浸透于RNAwait試劑中的樣品在37℃可保存一天,室溫保存一周,4℃保存一個月。

2) -20℃保存方法:樣本4℃浸透過夜,然后轉移至-20℃長期保存,RNAwait試劑不會在-20℃凍結,但有可能出現結晶。可直接放在室溫融化,不會影響RNA的提取量和完整性。

3) -80℃保存方法:樣本4℃浸透過夜,然后轉移至-80℃長期保存(建議樣品在轉移至-80℃前將其從RNAwait中取出,直接凍于-80℃保存)。樣本可直接放在室溫融化,再重新凍上,不會影響RNA的提取量和完整性。

3. RNA提取

4) 組織樣品:用干凈的鑷子從RNAwait中取出組織塊,吸水紙吸掉表面液體,之后立即置于裂解液中勻漿或液氮中研磨。

5) 細胞和細菌等樣品:加入與RNAwait等體積的DEPC處理水,10000g離心1min收集樣品,小心去除上清,后續即可用各種方法提取RNA。酵母和真菌參考本方法提取RNA。


注意事項

1、本產品除保護RNA外,也可保護樣品中的DNA和蛋白質的,但會導致蛋白質變性,不適用于天然蛋白質的提取。

2、本產品僅適用于新鮮組織樣品或細胞樣品。不可用于冰凍組織或細胞。

3、經本產品保存的樣品,會變得微硬,為正常現象。

4、本產品存放過程中可能會出現沉淀,使用前放到37℃水浴中加熱,沉淀溶解后不影響使用。

5、為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。


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