Zamboni固定液固定時間是多久
Zamboni-固定液(Zamboni Fluid)主要由PA、多聚甲醛、磷酸鹽等組成,PA可沉淀蛋白引起組織收縮,但不會使組織硬化, 其與甲醛和乙酸混合后,穿透速度加快,固定均勻,組織收縮輕微,對細胞的微細結構顯示的很清晰,為一種良好的固定液。
說明:固定液分為醛類固定液、汞類固定液、醇類固定液、氧化劑類固定液、苦酸鹽類固定液等,較為常用的是醛類中的福爾馬林、醇類中的乙醇。固定的目的在于保存細胞和組織的原有形態結構,固定劑能阻止內源性溶酶體酶對自身組織和細胞的自溶、抑制細菌和霉菌的生長。
用途:Zamboni-固定液是常用的混合型固定液之一,該固定液適用于電鏡免疫細胞化學,對超微結構的保存較純甲醛為優,也適用于光鏡免疫細胞化學的研究。固定時間為6-18小時。
操作步驟:(僅供參考)
1. 按實驗具體要求操作。
2. 一般僅需固定30~60min。如果組織塊大,可適當延長固定時間,但不宜超過24h。
3. 固定后組織可稍微流水沖洗或不沖洗直接轉入 70%的乙醇脫水,經乙醇脫水時可除去大部分PA,組織留有一點黃色,對染色也無影響。
微波輻射固定組織。
組織固定的結果是組織中的蛋白質凝固,以保存組織中原有的微細結構。常規固定用的是甲醛或酒精等。但是這些固定劑從某些方面來說其穿透力不很強,因而需要較長時間的固定,另者,臨床上的冰凍切片,有的應用快速加熱法預先固定組織,造成福爾馬林的極度揮發,污染環境,影響人們的身體健康,因此尋找其它固定組織的方法就成為研究的重點。微波輻射固定組織,就是在這種情況下產生的。微波是一種具有能量的電磁波,在其運動期間可產生瞬間熱。由于微波的快速運動,也導致了物體部極性分子的快速運動,產生了熱量,致使組織蛋白凝固,因此,舊的叫法稱微輻射固定組織。按實際的應稱為微波輻射凝固蛋白。
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